Полимеразная цепная реакция
Полимеразная цепная реакция представляет собой метод диагностики инфекционных процессов, основанный на выявлении в исследуемом материале уникальных фрагментов молекулы ДНК. Технология была открыта в 1983 году ученым Кэри Б. Мюллис, он удостоился Нобелевской премии. С тех пор ПЦР стал одним из основных в исследовании вирусов и микробов, применяется в различных отраслях медицины.
В основе метода лежит выделение из биологических жидкостей и тканей организма молекул ДНК инфекционного агента. Далее происходит многократно повторяющийся цикл при помощи фермента ДНК-полимеразы, приводящий к синтезу копий ДНК имеющегося микроорганизма. При достижении значительного объема копии ДНК их можно легко визуально определить различными тестами. В настоящее время существует множество модификаций ПЦР-диагностики: ступенчатый метод, со случайной амплификацией полиморфной ДНК, групп-специфическая, количественная реакция и др.
Для полимеразной цепной реакции используются:
- соскобы эпителиальных клеток из уретры, стенки влагалища и цервикального канала;
- кровь;
- моча;
- отделяемое эрозий и язв кожи и слизистой;
- аспираты из полости матки и объемных образований;
- эякулят;
- секрет предстательной железы.
Наиболее часто ПЦР применяется в венерологии, урологии и гинекологии с целью диагностики венерических заболеваний, вирусных инфекций, таких как вирус папилломы человека. Кроме того, метод позволяет быстро и точно выявить ВИЧ инфекцию, вирус гепатита человека.
Правила забора материала
Перед исследованием рекомендуется в течение 2-3 часов воздержаться от мочеиспускания. Женщинам не следует проводить спринцевание и использовать различные лекарственные препараты для влагалищного применения. Также необходимо учитывать тот факт, что недавняя антибактериальная терапия может дать отрицательный результат ПЦР при наличии инфекции. После приема антибиотика должно пройти не менее 3-4 недель.
Метод полимеразной цепной реакции отличается высокой информативностью и чувствительностью, низким числом ложноположительных или ложноотрицательных результатов, низкой стоимостью и небольшими сроками проведения.
ПЦР в настоящее время применяется также для диагностики пиелонефритов, для диагностики госпитальных мочевых инфекций в урологии и гинекологии, для диагностики опасных инфекций (чума, желтая лихорадка, бруцеллез и другие).
Уникальной особенностью этого типа диагностики является то, что наличие бактериального или вирусного агента можно определить уже на стадии инкубационного периода, а также в случаях бессимптомного течения инфекционного процесса.